Ultra nukleazë GMP-grade
Numri i maces: HC2016A
UltraNuclease GMP-grade shprehet dhe pastrohet në Escherichia coli (E.coli) nga inxhinieri gjenetik dhe i përgatitur nën mjediset GMP.Mund të zvogëlojë viskozitetin e supernatantit qelizor dhe lizatit qelizor në kërkimin shkencor, të rrisë efikasitetin e pastrimit të proteinave dhe të përmirësojë kërkimin funksional të proteinave.Produkti gjithashtu mund të reduktojë mbetjet e acidit nukleik të bujtësit në shkallën pg, duke përmirësuar performancën dhe sigurinë e produkteve biologjike të aplikacioneve, duke përfshirë pastrimin e virusit, prodhimin e vaksinave dhe prodhimin farmaceutik të proteinave/polisakaridit.Përveç kësaj, produkti mund të aplikohet gjithashtu për të parandaluar grumbullimin e qelizave mononukleare të gjakut periferik të njeriut (PBMC) në terapinë e qelizave dhe zhvillimin e vaksinave.
UltraNuclease ofrohet në formën e një reagjenti të sterilizuar, i elutur në tampon (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glicerinë), me pamjen e një lëngu të pangjyrë, transparent.Ky produkt prodhohet sipas kërkesave të procesit GMP dhe ofrohet në formë të lëngshme.
Komponentët
UltraNuclease GMP-grade (250 U/μL)
Kushtet e ruajtjes
Produkti dërgohet me akull të thatë dhe mund të ruhet në -25℃~-15°C për dy vjet.
Nëse produkti hapet dhe është ruajtur në 4℃ për më shumë se një javë, rekomandojmë filtriminprodukti për të parandaluar kontaminimin mikrobik.
Specifikimet
| Pritësi i shprehjes | E. coli rekombinant me gjenin UltraNuclease |
| Peshë molekulare | 26,5 kDa |
| pikë elektrike | 6.85 |
| Pastërti | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Buferi i ruajtjes | 20mM Tris-HCL pH 8,0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glicerinë |
|
Përkufizimi i njësisë | Përkufizimi i një njësie aktiviteti (U) është sasia e enzimës që përdoret për tëndryshoni vlerën e absorbimit të ΔA260 me 1.0 në 30 minuta në një 2.625 mLsistemi i reagimit në 37℃ me një pH prej 8.0 (ekuivalente me tretjen e plotë të37 μg ADN e spermës së salmonit në oligonukleotide). |
Udhëzimet
1. Mostra Mbledhja
Qelizat ngjitëse: hiqni mediumin, lani qelizat me PBS dhe hiqni supernatantin.
Qelizat e pezullimit: mblidhni qelizat me centrifugim, lani qelizat me PBS, centrifugoni në 6000rpm për 10 min, mblidhni peletin.
Escherichia coli: mblidhni bakteret me centrifugim, lani një herë me PBS, centrifugoni në 8000rpm për 5 min dhe mblidhni peletin.
2. Trajtimi i mostrës
Trajtoni peletat e mbledhura të qelizave me tampon lize në raportin e masës (g) me vëllimin (mL) 1: (10-20), ose me metoda mekanike ose kimike në akull ose në temperaturën e dhomës (1 g pelet qelizor përmban rreth
109 qeliza).
3. Trajtimi me enzima
Shtoni 1-5 mM MgCl në sistemin e reaksionit dhe rregulloni pH në 8-9.
Shtoni UltraNuclease sipas raportit prej 250 Njësive për të tretur 1 g pelet qelizore, inkuboni në 37℃ për më shumë se 30 minuta.Ju lutemi referojuni formularit "Koha e rekomanduar e reagimit" për të zgjedhurkohëzgjatja e trajtimit.
4. Supernatanti Mbledhja
Centrifugoni në 12000 rpm për 30 minuta dhe mblidhni supernatantin.
Shënim: Nëse tretësira është acide ose alkaline, ose përmban përqendrime të larta kripe, detergjente osedenaturues, ju lutemi rrisni dozën e enzimës ose zgjasni kohën e trajtimit në përputhje me rrethanat.
Kushtet e rekomanduara të reagimitons
| Parametri | Gjendja optimale | Kushti efektiv |
| Mg² + Përqendrimi | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Temperatura | 37 ℃ | 0-42 ℃ |
| Përqendrimi i DTT | 0-100 mM | >0 mM |
| Përqendrimi i Merkaptoetanolit | 0-100 mM | >0 mM |
| Përqendrimi i kationit monovalent | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Përqendrimi i fosfatit | 0-10 mM | 0-100 mM |
Rekomanduar Reagimi Koha (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Sasia e UltraNukleazës (Përqendrimi përfundimtar) | Koha e reagimit |
| 0,25 U/mL | > 10 orë |
| 2,5 U/mL | > 4 orë |
| 25 U/mL | 30 min |
Shënime:
Ju lutemi vishni PPE-të e nevojshme, të tilla pallto laboratori dhe doreza, për të garantuar shëndetin dhe sigurinë tuaj!
