2×HiF Taq plus Master Mix
Numri i maces: HCR2014B
HIF Taq plus Master Mix (Me Dye) është një zgjidhje e gatshme për përdorim 2× e parapërzier që përmban Plus HIF ADN Polimerazë, dNTP dhe bufer të optimizuar.Dy antitrupa monoklonale në temperaturën e dhomës që pengojnë aktivitetin e polimerazës dhe aktivitetin 3'→5'eksonukleazë i shtohen përzierjes kryesore për PCR të Hot Start lehtësisht dhe shumë specifike.Faktori i shtrirjes shtohet në përzierjen kryesore për t'i dhënë enzimës një kapacitet të gjatë përforcues të fragmentit, gjatësia e amplifikimit mund të jetë deri në 13 kb, enzima ka një aktivitet 5'→3' ADN polimerazë dhe një 3'→5' Aktiviteti i ekzonukleazës, besnikëria e tij është 83 herë më e lartë se ajo e polimerazës së ADN-së Taq, e cila është 9 herë më e madhe se ajo e polimerazës së zakonshme të ADN-së.Është i përshtatshëm për amplifikimin e shablloneve komplekse, produkti i amplifikimit është një fund i hapur.
2×HIF Taq plus Master Mix(Me Dye) ka avantazhet e shpejtë dhe të lehtë, ndjeshmëri të lartë, specifikë të fortë, stabilitet të mirë, etj., sistemi i reagimit duhet vetëm të shtojë primerë dhe shabllone dhe mund të përforcohet me dy protokolli i hapave, duke thjeshtuar hapat eksperimentalë dhe duke kursyer kohë.Ky produkt përmban ngjyra treguese të elektroforezës dhe produktet PCR mund të përdoren drejtpërdrejt për elektroforezë.Përveç kësaj, produkti përmban gjithashtu një agjent mbrojtës specifik, në mënyrë që përzierja kryesore të mund të mbajë aktivitet të qëndrueshëm pas ngrirje-shkrirjes së përsëritur.
Kushtet e ruajtjes
Produktet duhet të ruhen në -25~-15℃ për 1 vit.
Specifikimet
| Specifikim produkti | Master Mix |
| Përqendrimi | 2× |
| Fillimi i nxehtë | Nisja e nxehtë e integruar |
| Mbingarkesa | E paqartë |
| Shpejtësia e reagimit | E shpejte |
| Madhësia (Produkti përfundimtar) | Deri në 13 kb |
| Kushtet e transportit | Akull i thatë |
| Tipi i produktit | Premikse PCR me besueshmëri të lartë |
Udhëzimet
1.Sistemi i reagimit PCR
| Komponentët | Vëllimi (μL) |
| Shablloni i ADN-së | Të përshtatshme |
| Primer përpara (10 μmol/L) | 2.5 |
| Primer i kundërt (10 μmol/L) | 2.5 |
| 2×HIF Taq plus Master Mix | 25 |
| ddH2O | deri në 50 |
2.Përdorimi i rekomanduar i shablloneve të ndryshëm
| Lloji i shabllonit | Përforconi fragmente nga 1 kb në 10 kb |
| ADN gjenomike | 50 ng-200 ng |
| ADN plazmide ose virale | 10 pg-20 ng |
| cADN | 1-2,5 µL (Mos e kaloni 10% të vëllimit përfundimtar të reagimit PCR) |
3.Protokolli i Amplifikimit
1) Protokolli me dy hapa (shabllon kompleksiteti)
| Hapi i ciklit | Temp. | Koha | Ciklet |
| Denatyrimi fillestar | 98 ℃ | 3 min | 1 |
| Denatyrimi | 98 ℃ | 10 sek | 30-35 |
| Zgjerim | 68 ℃ | 30 sek/kb | |
| Zgjatja përfundimtare | 72 ℃ | 5 min | 1 |
2) Protokolli me tre hapa (protokoll i rregullt)
| Hapi i ciklit | Temp. | Koha | Ciklet |
| Denatyrimi fillestar | 98 ℃ | 3 min | 1 |
| Denatyrimi | 98 ℃ | 10 sek | 30-35 |
| Pjekja | 60 ℃ | 20 sek | |
| Zgjerim | 72 ℃ | 30 sek/kb | |
| Zgjatja përfundimtare | 72 ℃ | 5 min | 1 |
3) Protokolli i Pjekjes së Gradientit (model i kompleksitetit)
| Hapi i ciklit | Temperatura | Koha | Ciklet |
| Denatyrimi fillestar | 98 ℃ | 3 min | 1 |
| Denatyrimi | 98 ℃ | 10 sek | 15 (1℃ ulje për cikël) |
| Pjekja me gradient | 70-55 ℃ | 20 sek | |
| Zgjerim | 72 ℃ | 30 sek/kb | |
| Denatyrimi | 98 ℃ | 10 sek |
20 |
| Pjekja | 55 ℃ | 20 sek | |
| Zgjerim | 72 ℃ | 30 sek/kb | |
| Zgjatja përfundimtare | 72 ℃ | 5 min | 1 |
Karakteristikat sipas protokolleve të ndryshme të amplifikimit
| Protokol | Dy hapa | me tre hapa | Pjekja me gradient |
| Spec. | shpejtë | e mesme | i ngadalshëm |
| Specifikimi | lartë | e mesme | lartë |
| Rendimenti i PCR | e mesme | lartë | e mesme |
| Shkalla e zbulimit | lartë | e mesme | lartë |
Shënime
Ju lutemi vishni PPE-të e nevojshme, të tilla pallto laboratori dhe doreza, për të garantuar shëndetin dhe sigurinë tuaj!
