Një hap i shpejtë RT-qPCR Probe Premix-UNG
Numri i maceve: HCR5143A
Kompleti i sondës me një hap RT-qPCR (FOR FAST) është një komplet zbulimi i shpejtë RT-qPCR i bazuar në sondë, i përshtatshëm për PCR sasiore me një plex ose multipleks duke përdorur ARN-në si shabllon (si p.sh. virusi ARN).Ky produkt përdor një gjeneratë të re të polimerazës Taq DNA të modifikuar me antitrupa dhe transkriptazës së kundërt të dedikuar me një hap, me një tampon të optimizuar për amplifikimin e shpejtë, i cili ka shpejtësi më të shpejtë të amplifikimit, efikasitet dhe specifikë më të lartë të amplifikimit.Ai mbështet amplifikimin e balancuar si në një plex ashtu edhe në multipleks të mostrave me përqendrim të ulët dhe të lartë në një kohë të shkurtër.
Komponentët
1. Bufer 5×RT-qPCR (U+)
2. Përzierje enzimash (U+)
Shënime:
a.Buferi 5×RT-qPCR (U+) përfshin dNTP dhe Mg2+;
b.Përzierja e enzimës (U+) përfshin transkriptazën e kundërt, polimerazën e ADN-së Hot Start Taq, frenuesin RNase dhe UDG;
c.Përdorni këshilla pa RNase, tuba EP, etj.
Përpara përdorimit, përzieni tërësisht buferin 5×RT-qPCR (U+).Nëse pas shkrirjes ka ndonjë reshje, prisni që tamponi të kthehet në temperaturën e dhomës, përzihet dhe shpërndahet dhe më pas përdorni ato normalisht.
Kushtet e ruajtjes
Produkti dërgohet me akull të thatë dhe mund të ruhet në -25~-15℃ për 1 vit.
Udhëzimet
1. Reagimi Sistemi
| Komponentët | Vëllimi (20 μL reagim) |
| 2 ×RT-qPCR tampon | 4 μL |
| Përzierja e enzimave (U+) | 0.8 μL |
| Primer Forward | 0,1~ 1,0μM |
| Abetare e kundërt | 0,1~ 1,0μM |
| Sonda TaqMan | 0,05~0,25μM |
| shabllon | X μL |
| Uji pa RNase | deri në 25 μL |
Shënime: Vëllimi i reagimit është 10-50μL.
2. Protokolli i Çiklizmit (Sstandard)
| Cikli hap | Temp. | Koha | Ciklet |
| Transkriptimi i kundërt | 55 ℃ | 10 min | 1 |
| Denatyrimi fillestar | 95 ℃ | 30 sek | 1 |
| Denatyrimi | 95 ℃ | 10 sek | 45 |
| Pjekja/Zgjatja | 60 ℃ | 30 sek |
| Protokolli i Çiklizmit (Shpejt) Cikli hap |
Temp. |
Koha |
Ciklet |
| Transkriptimi i kundërt | 55 ℃ | 5 min | 1 |
| Denatyrimi fillestar | 95 ℃ | 5 s | 1 |
| Denatyrimi | 95 ℃ | 3 s | 43 |
| Pjekja/Zgjatja | 60 ℃ | 10 s |
Shënime:
a.Temperatura e transkriptimit të kundërt është midis 50℃ në 60℃, rritja e temperaturës ndihmon në përforcimin e strukturave komplekse dhe shablloneve me përmbajtje të lartë CG;
b.Temperatura optimale e pjekjes duhet të rregullohet bazuar në vlerën Tm të primerit dhe të zgjidhet koha më e shkurtër për mbledhjen e sinjalit të fluoreshencës bazuar në instrumentin PCR në kohë reale.
Shënime
Ju lutemi vishni PPE-të e nevojshme, të tilla pallto laboratori dhe doreza, për të garantuar shëndetin dhe sigurinë tuaj!
