Bst 2.0 ADN Polimerazë (pa glicerinë, me densitet të lartë)
Bst ADN polimeraza V2 rrjedh nga Bacillus stearothermophilus ADN Polimeraza I, e cila ka aktivitet 5'→3' ADN polimerazë dhe aktivitet të fortë zëvendësues të zinxhirit, por jo 5'→3' aktivitet ekzonukleazë.Bst ADN Polimeraza V2 është ideale për zhvendosjen e vargut, LAMP për amplifikimin izotermik (amplifikimi izotermik i ndërmjetësuar me lak) dhe renditjen e shpejtë.Kjo Bst ADN polimerazë V2 është e aftë të frenojë aktivitetin e ADN polimerazës në temperaturën e dhomës, në mënyrë që të mund të operohet dhe sistemi i reagimit të mund të formulohet në temperaturën e dhomës, duke parandaluar amplifikimin jospecifik dhe duke përmirësuar efikasitetin e reaksionit, dhe ky version mund të të liofilizohen.Përveç kësaj, ai është në gjendje të çlirojë aktivitetin e tij në temperatura të ngritura, duke eliminuar kështu nevojën për një hap të veçantë aktivizimi.
Komponentët
Komponenti | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
Bst ADN polimeraza V2 (pa glicerinë) (32U/μL) | 0,05 ml | 0,25 ml | 2,5 ml |
Bufer 10×HC Bst V2 | 1.5 ml | 2×1,5 ml | 3×10 ml |
MgSO4 (100 mm) | 1.5 ml | 2×1,5 ml | 2×10 ml |
Aplikacionet
1.Amplifikimi izotermik LAMP
2.Reaksioni i zhvendosjes së një vargu të ADN-së
3.Sekuenca e lartë e gjeneve GC
4.Sekuenca e ADN-së e nivelit të nanogramit.
Gjendja e ruajtjes
Transporti nën 0°C dhe ruhet në -25°C~-15°C.
Përkufizimi i njësisë
Një njësi përcaktohet si sasia e enzimës që përfshin 25 nmol dNTP në materialin e patretshëm në acid në 30 minuta në 65°C.
Reagimi LAMP
Komponentët | 25 μLSistemi |
Bufer 10×HC Bst V2 | 2.5 μL |
MgSO4 (100 mm) | 1.5 μL |
dNTP (10 mM secila) | 3.5 μL |
SYTO™ 16 Jeshile (25×)a | 1.0 μL |
Përzierja e primeritb | 6 μL |
Bst ADN Polimeraza V2 (pa glicerinë) (32 U/uL) | 0,25 μL |
shabllon | × μL |
ddH2O | Deri në 25 μL |
Shënime:
1) a.SYTOTM 16 E gjelbër (25×): Sipas nevojave eksperimentale, ngjyra të tjera mund të përdoren si zëvendësues;
2) b.Përzierja e primerit: përftohet duke përzier 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2.5 µM F3, 2.5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB dhe vëllime të tjera.
Reagimi dhe gjendja
Bufer 1 × HC Bst V2, temperatura e inkubacionit është midis 60°C dhe 65°C.
Inaktivizimi i nxehtësisë
80°C, 20 minuta.