2×PCR Master Mix (pa ngjyrues)
PCR Master Mix është një lloj solucioni konvencional i parapërzier PCR i cili është gati për t'u përdorur, duke përfshirë Taq DNA Polymerazën, përzierjen dNTP MgCl2 dhe buferin e optimizuar.Gjatë reagimit, vetëm abetarja dhe shablloni mund të shtohen për përforcim, gjë që thjeshton shumë hapat e funksionimit të eksperimentit.Ky produkt përmban stabilizues të shkëlqyer dhe mund të ruhet për 3 muaj në 4℃.Produkti PCR ka zgjatje 3'-dA dhe mund të klonohet lehtësisht në vektorin T.
Kushtet e ruajtjes
Produkti duhet të ruhet në -25℃~ -15℃ për dy vjet.
Specifikimet
Besnikëria (vs.Taq) | 1× |
Fillimi i nxehtë | No |
Mbingarkesa | 3′-A |
Polimeraza | Taq ADN Polimeraza |
Formati i reagimit | SuperMix ose Master Mix |
Shpejtësia e reagimit | Standard |
Tipi i produktit | PCR Master Mix (2×) |
Udhëzimet
1.Sistemi i reagimit
Komponentët | Madhësia (μL) |
ADN-ja e shabllonit | Të përshtatshme |
Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
PCR Master Mix | 25 |
ddH2O | Deri në 50 |
2.Protokolli i Amplifikimit
Hapat e ciklit | Temperatura (°C) | Koha | Ciklet |
Para-denatyrimi | 94 ℃ | 5 min | 1 |
Denatyrimi | 94 ℃ | 30 sek | 35 |
Pjekja | 50-60 ℃ | 30 sek | |
Zgjerim | 72 ℃ | 30-60 sek/kb | |
Zgjatja përfundimtare | 72 ℃ | 10 min | 1 |
Shënime:
1) Përdorimi i shabllonit: 50-200 ng ADN gjenomike;0,1- 10 ng ADN plazmide.
2) Mg2+përqendrimi: Ky produkt përmban 3 mM MgCl2 i përshtatshëm për shumicën e reaksioneve PCR.
3) Temperatura e pjekjes: Ju lutemi referojuni vlerës teorike Tm të Primer.Temperatura e pjekjes mund të vendoset në 2-5 ℃ më e ulët se vlera teorike e abetares.
4) Koha e zgjatjes: Për identifikimin molekular, rekomandohet 30 sec/kb.Për klonimin e gjeneve, 60sec/kb rekomandohet.
Shënime
1.Për sigurinë dhe shëndetin tuaj, ju lutemi vishni pallto laboratori dhe doreza njëpërdorimshe për operim.
2.Vetëm për përdorim kërkimor!