Fosfataza Alkaline (ALP)
Përshkrim
Fosfataza Alkaline rrjedh nga një shtam rekombinant E. coli që mbart gjenin TAB5.Enzima katalizon defosforilimin e skajeve 5' dhe 3' të fosfomonoestereve të ADN-së dhe ARN-së.Gjithashtu, hidrolizon ribozën, si dhe trifosfatet deoksiribonukleozide (NTP dhe dNTP).TAB5 Fosfataza Alkaline vepron në skajet 5' të spikatura, 5' të prera dhe të topitura.Fosfataza mund të përdoret në shumë aplikacione të biologjisë molekulare, të tilla si klonimi ose etiketimi i skajit të sondës për të hequr skajet e fosforiluara të ADN-së ose ARN-së.Në eksperimentet e klonimit, defosforilimi parandalon ADN-në e plazmidës të linearizuar nga vetëlidhja.Ai gjithashtu mund të degradojë dNTP-të e papërfshira në reaksionet PCR për të përgatitur një shabllon për renditjen e ADN-së.Enzima inaktivizohet plotësisht dhe në mënyrë të pakthyeshme duke u ngrohur në 70°C për 5 minuta, duke e bërë kështu të panevojshëm heqjen e fosfatazës përpara lidhjes ose etiketimit të fundit.
Përdorimi
1. Fosfataza alkaline e shoqëruar me proteina (antitrupa, streptavidin etj.) mund të identifikojë në mënyrë specifike molekulat e synuara dhe mund të përdoret në ELISA, WB dhe zbulimin histokimik;
2. Fosfataza alkaline mund të përdoret për të defosforizuar 5'-terminalin e ADN-së ose ARN-së për të parandaluar vetë-lidhjen;
3. ADN-ja ose ARN-ja e defosforiluar e mësipërme mund të etiketohet me fosfate të etiketuara me radio (nëpërmjet kinazës poli-nukleotide T4)
Struktura Kimike
Specifikim
Artikujt e testimit | Specifikimet |
Aktiviteti i enzimës | 5 U/μL |
Aktiviteti i endonukleazës | Nuk u zbulua |
Aktiviteti i ekzonukleazës | Nuk u zbulua |
Nicking Aktiviteti | Nuk u zbulua |
Aktiviteti RNase | Nuk u zbulua |
E.coli ADN | ≤1kopje/5U |
Endotoksina | LAL-Test, ≤10EU/mg |
Pastërti | ≥95% |
Transporti dhe magazinimi
Transporti:Ambient
Magazinimi:Ruani në 2-8°C
Rekomandohet ritestimiJeta:2 vit