Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Përshkrim
Numri i maces: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix është një Kit sasior PCR multipleks i bazuar në ARN si shabllon.Në eksperiment, transkriptimi i kundërt dhe PCR sasiore kryhen në të njëjtin tub reagimi, duke thjeshtuar funksionimin eksperimental dhe duke zvogëluar rrezikun e kontaminimit.Dizajni unik i përzierjes së tamponit dhe enzimës mund të përdoret në sistemin e liofilizuar me një hap.Kompleti përdor transkriptazën e kundërt rezistente ndaj nxehtësisë për sintezën efikase të cDNA-së së vargut të parë duke përdorur polimerazën e ADN-së Taq Start për amplifikimin sasior.Ai përmban tampon të optimizuar të reaksionit, përzierje enzimash etj., dhe u shtuan faktorë që pengojnë në mënyrë efektive amplifikimin PCR jo-specifik dhe rrisin efikasitetin e amplifikimit të reaksioneve të shumta qPCR, duke mundësuar amplifikimin sasior me fluoreshencë të shumëfishtë duke siguruar njëkohësisht efikasitetin e amplifikimit të primerëve.
Komponentët
| Emri |
| 1. Lyo-Buffer |
| 2. Përzierje Lyo-Enzime |
| 3. Lyo mbrojtës |
Gjendja e transportitjon
Përgjigje: Lyo-bufer dhe mbrojtës: -25~-15℃, afati i ruajtjes është 1 vit.
B: Përzierje Lyo-enzimë, 2-8 ℃, afati i ruajtjes është 6 muaj.
Udhëzim për funksionimin
1. Sistemi i reagimit (merr 25 μL si shembull)
| Komponentët | Vëllimi (μL) | Përqendrimi përfundimtar |
| Lyo-Buffer | 6 | 1* |
| Përzierje Lyo-Enzime | 1 | - |
| Lyo-Protectant | 8 | - |
| Përzierja e primerit (10μM) | 1 | 0,1- 1 uM |
| Përzierja e sondës (10μM) | 0.5 | 0,05-0,5uM |
| Shablloni i ARN-së | 5 | - |
| DEPC H2O | Deri në 25 | - |
2. Protokolli i optimizuar i çiklizmit
1) Protokolli standard i çiklizmit
| Faza e reagimit | Temperatura | Koha | Cikli | |
| 1 | Transkriptimi i kundërt | 50°Ca | 10 min | 1 |
| 2 | Denatyrimi fillestar | 95°C | 5 min | 1 |
| 3 | Reaksioni i përforcimit | 95°C | 15 sek | 45 cikle |
| 60°Cb | 30 sekc |
2) Protokolli i çiklizmit të shpejtë
|
| Faza e reagimit | Temperatura | Koha | Cikli |
| 1 | Transkriptimi i kundërt | 50°Ca | 2 min | 1 |
| 2 | Denatyrimi fillestar | 95°C | 2 sek | 1 |
| 3 | Reaksioni i përforcimit | 95°C | 1 sek |
45 cikle |
| 60°Cb | 13 sekc |
Shënim:
a) E kundërta transkriptimi: Temperatura mund të zgjedhë 42°C ose 50°C për 10-15 minuta.
b) Reaksioni i përforcimit: Temperatura rregullohet sipas vlerës Tm të primerëve të projektuar.
c)Fluoreshenca sinjal përvetësimi: Ju lutemi vendosni procedurën eksperimentale sipas kërkesave tëmanual instrumenti.
Informacioni/Specifikimet teknike
| Fillimi i nxehtë | Nisja e nxehtë e integruar |
| Metoda e zbulimit | Zbulimi i sondës së primerit |
| Metoda PCR | Një hap RT-qPCR |
| Lloji i mostrës | ARN |
Shënime
1. Ky produkt është vetëm për përdorim kërkimor.
2. Ju lutemi vishni PPE-të e nevojshme, të tilla si pallto laboratori dhe doreza, për të garantuar shëndetin dhe sigurinë tuaj!
